試管嬰兒“冬眠”和“蘇醒”之----胚胎冷凍和復(fù)蘇

試管嬰兒“冬眠”和“蘇醒”之----胚胎冷凍和復(fù)蘇

前邊我們介紹了“試管baby”是通過(guò)常規(guī)體外受精技術(shù)和卵胞漿內(nèi)單精子注射技術(shù)產(chǎn)生，準(zhǔn)爸媽心里難免有些疑問(wèn)？

優(yōu)質(zhì)胚胎的安置有兩種方式：冷凍保存和移植，我們先來(lái)認(rèn)識(shí)一下“冷凍保存”，即試管嬰兒“冬眠”和“蘇醒”。在采卵后D3、D5或D6，醫(yī)生會(huì)告知準(zhǔn)爸媽有“幾”個(gè)優(yōu)質(zhì)胚胎，鑒于沒(méi)有新鮮移植的條件，您的優(yōu)質(zhì)胚胎進(jìn)行冷凍保存，待子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備好后再行復(fù)蘇后移植。

“冷凍保存”是不是直接將您的胚胎丟進(jìn)冰箱的冷凍室內(nèi)，No, No，No。冷凍保存技術(shù)是將胚胎或細(xì)胞置于含有冷凍保護(hù)劑的溶液中，利用特殊的保護(hù)措施和降溫程序，使胚胎在-196的條件下停止代謝，對(duì)其長(zhǎng)期保存的過(guò)程。在這一過(guò)程中，細(xì)胞的代謝活動(dòng)被完全抑制，使胚胎處于靜止?fàn)顟B(tài)，從而達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。臨床上冷凍保存技術(shù)有兩種：慢速冷凍和玻璃化冷凍技術(shù)。

慢速冷凍是通過(guò)設(shè)定好的程序緩慢降溫，最后投入液氮中冷凍保存，是臨床最早使用的冷凍保存技術(shù)。慢速冷凍通過(guò)低濃度冷凍保護(hù)劑梯度脫水，引起胚胎細(xì)胞內(nèi)冰晶形成，對(duì)胚胎形成損傷，從而降低了卵子及胚胎的臨床結(jié)局。慢速冷凍還需要昂貴的儀器，整個(gè)冷凍過(guò)程時(shí)間長(zhǎng)，在臨床上已經(jīng)逐漸被淘汰。

玻璃化冷凍通過(guò)高濃度的冷凍保護(hù)劑快速置換細(xì)胞中水，隨后直接投入液氮中立即固化?？焖倮鋮s，高濃度的冷凍保護(hù)劑使胚胎細(xì)胞形成透明的玻璃狀固體，避免了冰晶形成，也提高了降溫速率。玻璃化冷凍由于簡(jiǎn)便易行，減少細(xì)胞損傷，冷凍復(fù)蘇的存活率達(dá)98%以上，且移植成功率在50～60%，已是胚胎學(xué)家冷凍“試管baby”的常規(guī)冷凍保存方法。

冷凍胚胎，也就是常說(shuō)的“凍胚”可以直接使用嗎？回答是“不能”?；颊呃鋬龅呐咛ゲ还苁锹蚜哑冢ǖ谌欤?，還是囊胚期，都稱為“凍胚”。凍胚在-196度液氮中“冬眠”，需要“喚醒”沉睡狀態(tài)的胚胎，才可以用于后續(xù)治療，這個(gè)“喚醒”過(guò)程即為復(fù)蘇。液氮中“冬眠”的胚胎細(xì)胞內(nèi)是高滲狀態(tài)，從液氮中取出后，立即放入形成低滲環(huán)境的含有非滲透性冷凍保護(hù)劑的復(fù)蘇液中，通過(guò)由高到低濃度的復(fù)蘇液，胚胎細(xì)胞逐漸恢復(fù)等滲狀態(tài)，從而“喚醒”了胚胎。隨著輔助生殖技術(shù)水平的提高，冷凍復(fù)蘇胚胎移植比例也逐漸增高。冷凍復(fù)蘇技術(shù)的優(yōu)勢(shì)：一、可以合理限制移植胚胎數(shù)，降低多胎妊娠率；二、為胚胎移植失敗或流產(chǎn)患者提供再次移植機(jī)會(huì)；三、目前國(guó)內(nèi)倡導(dǎo)二胎、三胎政策，冷凍復(fù)蘇移植技術(shù)可以保存過(guò)剩胚胎等生育力，節(jié)約了患者的治療費(fèi)用。

下邊關(guān)于冷凍保存的常見(jiàn)問(wèn)題進(jìn)行解答：

1、冷凍胚胎的適用對(duì)象？

答： 1）IVF或ICSI新鮮治療周期過(guò)程中胚胎移植后剩余優(yōu)質(zhì)胚胎；2）新鮮治療周期因母體因素（卵巢過(guò)度刺激、子宮內(nèi)膜不合格、發(fā)熱等）不適合移植，可將優(yōu)質(zhì)胚胎冷凍保存待移植；3）卵巢功能降低、高齡等患者，可冷凍保存積攢優(yōu)質(zhì)胚胎用于移植；4）行胚胎移植前遺傳學(xué)診斷或篩查的患者；5）生育力保存。

2、胚胎冷凍原因？

答：在國(guó)家倡導(dǎo)生育二胎、三胎的政策下，而體外受精-胚胎移植的高昂費(fèi)用、有限成功率和多余胚胎的存在，以及政策和倫理對(duì)胚胎移植數(shù)目的限制，從最大限度地保護(hù)患者利益出發(fā)，應(yīng)盡可能提高每一取卵周期的臨床妊娠率，因而胚胎冷凍技術(shù)極為重要。

3、“凍胚”是指什么？

答：D3 卵裂期胚胎 或 D5 囊胚期胚胎的冷凍保存都被稱為“凍胚”，其中囊胚期的冷凍保存成功率要顯著高于卵裂期胚胎。每個(gè)周期獲得囊胚形成率為25～30%（按照卵子數(shù)為分母），卵裂期胚胎形成率為50～60%（按照卵子數(shù)為分母），因此患者要結(jié)合自身特點(diǎn)，聽(tīng)取醫(yī)生醫(yī)囑，選擇合適自己的胚胎冷凍時(shí)期。

4、冷凍保存對(duì)患者年齡有限制嗎？

答：理論上沒(méi)有年齡限制，國(guó)內(nèi)專家共識(shí)提示若女方年齡>52歲，不建議冷凍保存胚胎。

5、胚胎冷凍保存安全嗎？可以保存多長(zhǎng)時(shí)間？

答：國(guó)內(nèi)專家共識(shí)：冷凍保存對(duì)胚胎妊娠率、出生缺陷沒(méi)有顯著影響，國(guó)際一些研究結(jié)果顯示冷凍胚胎的復(fù)蘇移植是安全的。在穩(wěn)定的液氮環(huán)境及自然界輻射下，胚胎可以保存2000年以上，由于長(zhǎng)期冷凍可能帶來(lái)的生育風(fēng)險(xiǎn)及社會(huì)倫理問(wèn)題，中國(guó)專家共識(shí)建議冷凍保存期限不超過(guò)10年。