“試管baby”的第一個守護者都在做什么？

“試管baby”的第一個守護者都在做什么？

1978年7月25日，世界上第一例試管嬰兒出生，開啟了輔助生殖技術(shù)的新篇章。胚胎學(xué)家是“試管baby”的第一個守護者，因此每年的7月25日定義為“胚胎學(xué)家日”。準(zhǔn)爸媽將精、卵交給胚胎學(xué)家，胚胎學(xué)家精心呵護，神秘操作，讓“試管baby”在溫馨的大集體環(huán)境下健康發(fā)育。想不想知道胚胎學(xué)家一天的工作內(nèi)容嗎？分別在什么時段做哪些神秘操作嗎？我們一起來看看吧。

7:20 胚胎實驗室質(zhì)控

一年之計在于春，一天之計在于晨，早晨是一天最美的開始。為了給“試管baby”好的開始，所以胚胎學(xué)家在早晨就檢查“試管baby”的生活環(huán)境和條件是不是最舒適的，也就是胚胎實驗室質(zhì)控。質(zhì)控內(nèi)容主要包括胚胎實驗室溫度、濕度、環(huán)境（VOCs、氧氣含量、微粒及細菌等），培養(yǎng)箱質(zhì)控（溫度、濕度、CO2及O2含量等），操作臺溫板溫度、冰箱溫度，液氮罐液氮量及溫度，試劑和耗材批次等。1～2位胚胎學(xué)家到胚胎實驗室后，對以上質(zhì)控內(nèi)容進行檢測，胚胎實驗室溫度在24～26℃，濕度在40%～60%；二氧化碳培養(yǎng)箱溫度37℃，CO2濃度為6%，O2濃度為5%；操作臺溫板溫度控制在37～38℃等，若發(fā)現(xiàn)以上條件不滿足，應(yīng)及時調(diào)整，給“試管baby”一個溫暖舒適的培養(yǎng)環(huán)境，確保胚胎能夠健康發(fā)育。

7:40 IVF 取卵后第一天（D1） 剝蛋

IVF受精是將精卵放在培養(yǎng)皿中自由結(jié)合。精卵結(jié)合過程會將卵丘復(fù)合體中放射冠的卵丘細胞消化，而外圍的顆粒細胞還緊緊裹在卵子上。胚胎學(xué)家需要用略大于卵子直徑的剝卵針反復(fù)吹洗卵子，確認(rèn)卵子周圍的顆粒細胞脫落，便于顯微鏡下原核的觀察。

8:00 胚胎及受精觀察

精卵受精（D1）、第三天（D3）卵裂期胚胎發(fā)育、囊胚期（D5或D6）胚胎發(fā)育情況都需要在特定的時間去觀察，便于評估胚胎發(fā)育的時空性，選擇優(yōu)質(zhì)胚胎進行冷凍或移植。受精后17～20小時，D1在倒置顯微鏡下觀察原核判斷精卵受精，同時出現(xiàn)兩原核，兩極體的受精卵視為正常受精，轉(zhuǎn)入G-1培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。若出現(xiàn)3個原核，視為異常受精，直接丟棄；出現(xiàn)1個原核，在IVF周期中，會繼續(xù)培養(yǎng)，觀察后續(xù)胚胎發(fā)育情況，若在卵泡漿內(nèi)單精子注射（ICSI)周期中出現(xiàn)1個原核，將直接丟棄。除了判斷精卵受精情況，還會從原核在卵子中位置、兩原核相對位置、原核中核仁數(shù)目、空間分布等對原核進行評分。正常受精的受精卵在G-1中繼續(xù)培養(yǎng)至D3，通過卵裂球分裂速度、卵裂球數(shù)目、碎片程度來評分D3天胚胎，選擇優(yōu)質(zhì)胚胎要么置入G-2培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)至囊胚，要么冷凍，要么移植。若患者在D3選擇繼續(xù)囊胚培養(yǎng)，則需要在D5或D6觀察囊胚情況，通過擴張程度、內(nèi)細胞團細胞數(shù)目、滋養(yǎng)層細胞數(shù)目來對囊胚進行評分，選擇優(yōu)質(zhì)的囊胚行冷凍保存或移植，其余胚胎丟棄。

8:00 撿卵

撿卵用的G-MOPS-PLUS磷酸緩沖系培養(yǎng)基提前30分鐘37℃，無CO2的培養(yǎng)箱預(yù)熱。醫(yī)生在B超引導(dǎo)下吸出卵泡液，胚胎學(xué)家將卵泡液迅速轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，并在體視顯微鏡下觀察卵丘復(fù)合體，撿出卵丘復(fù)合體并依次用G-MOPS-PLUS清洗兩次，再用G-IVF清洗一次，并放入提前平衡好的G-IVF培養(yǎng)液中，于37℃，6%的CO2，5%的O2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，備用。

8:30 ，13:30 復(fù)蘇

胚胎學(xué)家早晨到胚胎實驗室后，準(zhǔn)備復(fù)蘇所用的復(fù)蘇液（包括TS DS WS1 WS2），其中TS 在37℃、無CO2的培養(yǎng)箱預(yù)熱30分鐘，其余三種復(fù)蘇液室溫平衡30分鐘，8:30開始上午復(fù)蘇操作。本中心上午復(fù)蘇患者基本都是上午復(fù)蘇，培養(yǎng)至下午的囊胚移植，所以建議患者盡量在8:30之前到達中心完成驗證工作，避免影響后續(xù)的培養(yǎng)及移植。下午13:30還有少部分患者復(fù)蘇D3卵裂期胚胎。

8:30，13:30 移植

8:30，13:30 都可以開始移植，移植為什么兩個時間，有區(qū)別嗎？8:30移植都是包含新鮮移植、D3胚胎移植及D3胚胎復(fù)蘇并囊胚培養(yǎng)的移植等。13:30移植主要是上午復(fù)蘇，體外培養(yǎng)2小時以上的囊胚移植。

9:30 ICSI D0 剝蛋

8:00開始采卵，其中ICSI周期的患者卵丘復(fù)合體取出后，在G-IVF中培養(yǎng)1～2小時后，可行剝卵操作，胚胎學(xué)家常稱之為“剝蛋”。剝蛋就是用一定濃度的透明質(zhì)酸酶消化卵丘復(fù)合體，用略大于卵子直徑的剝卵針反復(fù)吹洗卵子，剝離卵丘細胞和顆粒細胞。剝蛋后，胚胎學(xué)家需在顯微鏡下觀察卵子中是否含有第一極體，若有第一極體，卵子為成熟卵子（MII）并置于G-IVF微滴中繼續(xù)培養(yǎng)，下午13:30行ICSI操作。卵子中若無第一極體，即為不成熟卵子（MI、GV），將其丟棄。

9:45 冷凍

7:40胚胎觀察后，胚胎學(xué)家將D3、D5、D6中的優(yōu)質(zhì)胚胎情況反饋給臨床醫(yī)生。臨床醫(yī)生會依據(jù)患者個體化情況、患者自己意愿，選擇優(yōu)質(zhì)胚胎的去向：冷凍、移植或囊胚培養(yǎng)，隨后醫(yī)生將醫(yī)囑交回胚胎學(xué)家，胚胎學(xué)家遵醫(yī)囑，對優(yōu)質(zhì)胚胎行冷凍保存操作。

10:00 換液

胚胎學(xué)家將D3的優(yōu)質(zhì)胚胎情況反饋給臨床醫(yī)生。臨床醫(yī)生會依據(jù)患者個體化情況、患者自己意愿，決定優(yōu)質(zhì)胚胎是否繼續(xù)囊胚培養(yǎng)。胚胎學(xué)家遵囊胚培養(yǎng)的醫(yī)囑，對優(yōu)質(zhì)胚胎行換液操作，即將優(yōu)質(zhì)胚胎從G-1培養(yǎng)液中置換到G-2培養(yǎng)液中，于37℃，6%的CO2，5%的O2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2～3天。

10:00 活檢

植入前胚胎遺傳學(xué)篩查/診斷主要用于單基因病、反復(fù)移植失敗、反復(fù)流產(chǎn)、高齡等患者，隨著活檢和遺傳學(xué)分析技術(shù)的進步，此類患者的周期比例也逐漸增高。目前胚胎學(xué)家主要的活檢技術(shù)是囊胚滋養(yǎng)層細胞活檢技術(shù)，即利用顯微操作儀吸取3～5個滋養(yǎng)層細胞，用于單細胞測序分析染色體數(shù)目、結(jié)構(gòu)等。胚胎活檢后行全胚冷凍，待活檢結(jié)果出來后，選擇正常的胚胎進行移植。

11:20 體外受精（IVF）

HCG注射后38～40小時，是胚胎學(xué)家IVF授精時機。胚胎學(xué)家將處理好的卵子和精子按照一定比例混合培養(yǎng)，讓精卵自由組合，完成IVF授精過程。

13:30 ICSI

ICSI周期的單精子注射卵子的操作從13:30開始， 通過顯微操作系統(tǒng)，將單個精子注入卵子。ICSI結(jié)束后，直接將注入精子后的MII卵子移入G-1培養(yǎng)液中，于37℃，6%的CO2，5%的O2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待D1原核觀察。

16:30 撈蛋、早剝

IVF受精4～6小時，胚胎學(xué)家會撈蛋和早剝，其目的一是依據(jù)第二極體是否排出，判斷精卵受精情況；二是改善精卵的培養(yǎng)環(huán)境。若患者為原發(fā)不孕、第一IVF周期，則會早剝2～3個卵子，如果出現(xiàn)1～2個卵子出現(xiàn)雙極體，則說明受精情況良好。若受精情況不好，則會于18:00再次觀察受精情況，無改善立即行進行補救ICSI。

13:30 配液、培養(yǎng)皿上貼每位患者專用標(biāo)簽

卵子受精、培養(yǎng)，胚胎培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液都應(yīng)37℃，6%的CO2培養(yǎng)箱中平衡8小時以上，因此應(yīng)提前配制第二天采卵、胚胎培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液。除了配制平衡培養(yǎng)所用液體，還應(yīng)在每個培養(yǎng)皿上貼上患者門診號所對應(yīng)的芯片和核對條碼，便于操作時的核對。

除以上工作外，胚胎學(xué)家還有病歷登記的信息書寫及記錄，各種質(zhì)控、胚胎實驗室數(shù)據(jù)的錄入，實驗儀器設(shè)備的維護等等。在幕后默默照顧“試管baby”的胚胎學(xué)家，為每一個受精卵及胚胎保駕護航，雙手捧起“試管baby”，承載了生命的起點。