原理
用熱水抽提樣品中的氯化物,沉淀蛋白質(zhì),過(guò)濾后將濾液酸化,加入過(guò)量的硝酸銀,以硫酸鐵銨為指示劑,用硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定過(guò)量的硝酸銀。
試劑如無(wú)特別說(shuō)明,所用試劑均為分析純。
(1)水:蒸餾水,不含鹵素,并應(yīng)符合GB/T 6682-1992的規(guī)定。
不含鹵素測(cè)試:量取100mL水,加入1mL水,加入1mL硝酸銀(0.1mol/L)和5mL硝酸(4mol/L),不應(yīng)出現(xiàn)輕微混濁或渾濁。
(2)硝基苯或1-壬醇。
(3)硝酸(4mol/L):量取1體積濃硝酸和3體積水,混勻。
(4)蛋白質(zhì)沉淀劑:
試劑A:將106g亞鐵氰化鉀〔K4Fe (CN)6·3H2O〕用水溶解,轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中,用水定容。
試劑B:將220g乙酸鋅〔Zn (CH3COO)2·2H2O〕用水溶解,加入冰乙酸30mL,轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中,用水定容。
(5)硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L):先將硝酸銀在150℃±2℃的溫度下干燥2h,然后置于干燥器內(nèi)使其冷卻,取取16.989g,水溶解,轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中,用水定容。
此標(biāo)準(zhǔn)溶液用棕色玻璃容器盛裝,避光存放。
(6)硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L):稱取約9.7g硫氰酸鉀,用水溶解,轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中,用水定容。用硫酸鐵(III)銨指示劑、硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L)標(biāo)定。準(zhǔn)確至0.0001mol/L。
(7)硫酸鐵(III)銨[NH4Fe(SO4)2·12H2O]飽和溶液:稱取50g硫酸亞鐵銨,在室溫下用水溶解并稀釋至100mL,如有沉淀應(yīng)過(guò)濾。
(8)冰乙酸。
儀器和設(shè)備實(shí)驗(yàn)室常規(guī)設(shè)備及下列設(shè)備。
(1)均質(zhì)器:用于試樣的均質(zhì)化,包括高速旋轉(zhuǎn)的切割機(jī),或多孔板的孔徑不超過(guò)4.5mm的絞肉機(jī)。
(2)容量瓶:1000mL和200mL。
(3)錐形瓶:250mL。
(4)滴定管:25mL或50mL。
(5)單刻度移液管:20mL
(6)水浴鍋。
(7)分析天平:可準(zhǔn)確稱重至±0.001g。
取樣實(shí)驗(yàn)室所收到的樣品應(yīng)具有代表性且在運(yùn)輸和儲(chǔ)藏過(guò)程中無(wú)受損或發(fā)生變化。
取樣方法參見(jiàn)GB∕T 9695.19。
取有代表性的樣品200 g。
試樣制備使用均質(zhì)器將試樣均質(zhì)。注意避免試樣的溫度超過(guò)25℃。若使用絞肉機(jī),試樣至少通過(guò)該設(shè)備兩次。
將試樣裝入密封的容器里,防止變質(zhì)和成分變化。試樣應(yīng)在均質(zhì)化后24 h內(nèi)盡快分析。
分析步驟試樣稱取10g試樣,精確至0.001g,移入錐形瓶中。
沉淀蛋白質(zhì)往試樣中加入100mL水,置于沸水浴中,加熱15min,不時(shí)搖動(dòng)錐形瓶。
取出錐形瓶,將內(nèi)容物全部移入200mL容量瓶中,并冷至室溫,然后依次加入試劑A和試劑B各2mL,每次加液后都充分搖勻。
室溫下靜止30min,用水稀釋至刻度,充分搖勻,用定量濾紙過(guò)濾。
注:如果此方法用于測(cè)定硝酸鹽和亞硝酸鹽,或樣品中抗壞血酸的含量超過(guò)0.1%,則需在試樣中加入0.5g活性碳,加入試劑A和試劑B并混勻后,用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.5~8.3。
測(cè)定用移液管吸取濾液20mL于錐形瓶中,加入稀硝酸溶液(4mol/L)5mL和硫酸鐵銨指示劑1mL。
用移液管吸取20mL硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L)于錐形瓶中,加入3mL硝基苯或1-壬醇,充分混勻,用力搖動(dòng)以凝結(jié)沉淀。用硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L)滴定,直至出現(xiàn)穩(wěn)定的粉紅色。記錄所用硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,精確至0.05mL。
空白實(shí)驗(yàn)按分析步驟中沉淀蛋白質(zhì)和測(cè)定所規(guī)定的的操作,加入等體積的硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L),進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn)。
計(jì)算試樣中氯化物的含量按下式計(jì)算,其以氯化鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì):
式中:
w——樣品中氯化物含量(以氯化鈉計(jì))%;
V2——空白試驗(yàn)消耗硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,mL;
V1——滴定消耗硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,mL;
c——硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mol/L;
m—一試樣質(zhì)量,g;
200——試樣溶液的定容體積,mL;
20——滴定時(shí)吸取濾液的體積,mL;
結(jié)果報(bào)告精確至0.05%。
重復(fù)性同一分析者在同一實(shí)驗(yàn)室采用相同的方法和相同的儀器,在短時(shí)間間隔內(nèi)對(duì)同一樣品獨(dú)立測(cè)定兩次,當(dāng)氯化鈉含量在1.0%-2.0%之間時(shí),兩次測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的0.15%(質(zhì)量比);當(dāng)氯化鈉含量在2.0%以上時(shí),兩次測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的0.20%(質(zhì)量比)。1