SPA的理化性質
SPA含氮量14一16%,系單一的多從鏈,約含395個氨其酸(AA),有亮、領脯、蘇、甘、丙、絲、谷、門冬及賴氨酸十種。每條多膚鏈含4個高度同源的Fc結合區(qū),即D、A、B、C,各區(qū)大約由55一62個AA殘基組成。
通過對5PA所做的DNA順序測定,發(fā)現(xiàn)SPA分子用胰蛋白酶消化可得D、A、B、C和X5個片段,其中D片段N端還有個分子量為7000左右的E區(qū),此區(qū)由50個AA組成,其中42個AA與D區(qū)一致,隨后是AA琉水性連續(xù)區(qū),轉譯密碼子可能是TTG,從TTG向前的6個核普酸呈Shine一Dalg一arn。順序稱為S區(qū),由此歸納SPA分子結構可分為S、E、D、A、B、C和X7區(qū)。1
免疫學特性葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,SPA),是存在于葡萄球菌細胞壁的一種表面蛋白。
SPA之所以能引起免疫學家的極大興趣,是因為它具有和多種動物血清化G分子Fc段結合的特性,SPA可與多種哺乳動物(豬、豚鼠、小鼠、狗和猴等)血清或1gG產(chǎn)生沉淀線,其中以豬血清反應滴度最高,對牛、馬、羊等未見沉淀線形成。魚類、兩棲類、爬行類及鳥類gIG均不能與比G發(fā)生反應。1
SPA可與人類和多種哺乳動物IgG的Fc段結合。SPA與IgG結合后的復合物具有抗吞噬、促細胞分裂、引起超敏反應、損傷血小板等多種生物學活性。
另一方面,SPA與IgG Fc結合后IgG(除了IgG3)的Fab段仍能特異性結合抗原,可用于協(xié)同凝集試驗,檢測多種細菌抗原或抗原抗體復合物。 SPA也是一種B細胞絲裂原,可使多克隆B細胞活化和增殖。
核心SPA是一種從金葡菌細胞壁分離的蛋白質。早在1940年,Vevwey發(fā)現(xiàn)在某些金葡菌中含有一種物質,在雙向擴散試驗中能與正常人血清形成沉淀,直到1963年Lofkvist等分離了SPA抗原,并證明其是一種蛋白質,隨后Grov將其命名為SPA。SPA存在于大多數(shù)金葡菌中,而不存在于凝固酶陰性菌株中。
SPA具有和人及許多動物IgG結合的能力,結合部位是Fc片段而不是Fab片段,結合力是雙價的,每個SPA分子可以同時結合兩個IgG分子,也可一方面同IgG相結合,一方面與標記物如熒光素、過氧化物酶、膠體金和鐵蛋白等相結合。
應用葡萄球菌A蛋白快速檢測金黃色葡萄球菌目前應用于臨床的顯色培養(yǎng)基檢測金葡菌仍需24h,而SPA檢測的整個操作過程不到1h,遠遠快于前者,達到了真正意義上的快速檢測的要求,且整個操作簡單、便捷,所需耗材少,靈敏度和特異度較高,適于臨床快速檢測的開展。
由于我們的研究仍處于初期階段,如何減少溶血葡萄球菌對檢測的干擾,提高該診斷的準確性還有待于我們更多的臨床資料研究。有報道應用免疫磁珠技術可以使細菌富集,結合SPA方法可用來建立一種金葡菌快速分離檢驗的體系。2
葡萄球菌蛋白體內抗腫瘤效應多數(shù)研究表明SPA直接體內注射治療實驗性腫瘤具有明顯的抗腫瘤效應,其機理可能與SPA清除循環(huán)免疫復合物、誘導干擾素產(chǎn)生、增加補體依賴細胞毒抗體和外周血單個核細胞活性有關。據(jù)文獻報道SPA能增強正常動物的巨噬細胞和NK細胞活性。3