[科普中國]-菌落雜交技術(shù)

菌落(或噬菌斑)雜交技術(shù)1975年，格倫斯坦(M.Grunstein)和霍格內(nèi)斯(D.S.Hogness)對索森吸引技術(shù)作了一些修改，發(fā)展為菌落雜交技術(shù)。1977年本頓(W.D.Benton)和戴維斯(R.W.Davis)提出與此類似的篩選含有克隆DNA的只噬菌斑雜交技術(shù)。

簡介菌落(或噬菌斑)雜交技術(shù)1975年，格倫斯坦(M.Grunstein)和霍格內(nèi)斯(D.S.Hogness)對索森吸引技術(shù)作了一些修改，發(fā)展為菌落雜交技術(shù)。1977年本頓(W.D.Benton)和戴維斯(R.W.Davis)提出與此類似的篩選含有克隆DNA的只噬菌斑雜交技術(shù)。1

操作這類技術(shù)是把菌落或噬菌斑轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜上，使溶菌后變性的DNA同濾膜原位結(jié)合。帶有DNA印跡的這些濾膜烤干后，同放射性同位素標記的特異性DNA或RNA探針雜交，漂洗除去未雜交的探針，根據(jù)放射自顯影所揭示的同探針序列具有同源性的DNA印跡位置，對照原來的平板，便可以從中挑選出含有所期望的插入序列的菌落或噬菌斑。1

價值菌落雜交或噬菌斑雜交也叫原位雜交。因為生長在培養(yǎng)基平板的菌落或噬菌斑是按照其原來的位置不變地轉(zhuǎn)移到濾膜上，并在原位發(fā)生溶菌、DNA變性和雜交作用。要檢測真核基因組克隆中所希望的重組分子菌落或噬菌斑，往往要檢測大量菌落或噬菌斑，而原位雜交技術(shù)具有特殊的價值。1

本詞條內(nèi)容貢獻者為:

胡芳碧 - 副教授 - 西南大學